去除巨噬細(xì)胞是研究巨噬細(xì)胞功能的重要方法。巨噬細(xì)胞可吞噬氯磷酸-脂質(zhì)體(clodronate Liposome),在巨噬細(xì)胞溶酶體磷酸酶的作用下,溶解在脂質(zhì)體水相中的氯磷酸鹽就可以被逐步釋放出來(lái),并累積在細(xì)胞內(nèi),當(dāng)其達(dá)到一定濃度時(shí),可引起巨噬細(xì)胞的凋亡,從而去除巨噬細(xì)胞。clodronate Liposome可局部注射去除注射部位臨近的巨噬細(xì)胞,如肺、膝關(guān)節(jié)、腫瘤局部和腦等;也可尾靜脈或腹腔注射去除循環(huán)途徑中的單核巨噬細(xì)胞,如肝臟和脾臟中的巨噬細(xì)胞。
1ml脂質(zhì)體體懸液中所含的氯磷酸大約為5mg。所用的磷酸鹽緩沖液為10 mM Na2HPO4,10 mM NaH2PO4,140 mM NaCl。使用前搖勻。
尾靜脈注射方法
1、小鼠的尾部有2條動(dòng)脈和3條靜脈,2條動(dòng)脈分別在尾部的背側(cè)面和腹側(cè)面,3條靜脈呈品字型分布,一般采用左右兩側(cè)的靜脈;
2、將紗布浸泡于約70度的溫水中,拿出后包裹尾巴,以達(dá)到使尾部血管擴(kuò)張及軟化表皮角質(zhì)的目的;
3、行尾部靜脈注射時(shí),以左手拇指和食指前后摁住鼠尾,留出約2cm一段,使皮膚緊張,靜脈更為充盈,右手持1ml針頭注射器,使針頭與靜脈平行(小于30°角),從尾巴的下1/4處進(jìn)針,開(kāi)始注入藥物時(shí)應(yīng)緩慢,仔細(xì)觀察,如果無(wú)阻力,無(wú)白色皮丘出現(xiàn),說(shuō)明已刺入血管,可正式注入藥物。
4、有的實(shí)驗(yàn)需連日反復(fù)尾靜脈注射給藥,注射部位應(yīng)盡可能從尾端開(kāi)始,按次序向尾根部
移動(dòng),更換血管位置注射給藥。拔出針頭后,用棉球按住注射部位輕壓1-2min,止血。
訂購(gòu)信息:
貨號(hào) | 產(chǎn)品描述 | 規(guī)格 |
HDCL1705ml | Clodronate Liposomes體內(nèi)巨噬細(xì)胞清除試劑 | 5ml |
HDCL1710ml | Clodronate Liposomes體內(nèi)巨噬細(xì)胞清除試劑 | 10ml |
HDCL1720ml | Clodronate Liposomes體內(nèi)巨噬細(xì)胞清除試劑 | 20ml |
HDCL1750ml | Clodronate Liposomes體內(nèi)巨噬細(xì)胞清除試劑 | 50ml |
HDCL1780ml | Clodronate Liposomes體內(nèi)巨噬細(xì)胞清除試劑 | 80ml |
HDCL1790ml | Clodronate Liposomes體內(nèi)巨噬細(xì)胞清除試劑 | 90ml |
HDCL100ml | Clodronate Liposomes體內(nèi)巨噬細(xì)胞清除試劑 | 100ml |
HDCLP1705ml | Clodronate Liposomes and PBS Liposomes | 5ml |
HDCLP1710ml | Clodronate Liposomes and PBS Liposomes 體內(nèi)巨噬細(xì)胞清除試劑 | 10ml |
HDCLP1720ml | Clodronate Liposomes and PBS Liposomes | 20ml |
HDCLP1750ml | Clodronate Liposomes and PBS Liposomes | 50ml |
HDCLP1780ml | Clodronate Liposomes and PBS Liposomes | 80ml |
HDCLP17100ml | Clodronate Liposomes and PBS Liposomes | 100ml |
問(wèn)與答:
Q:收到Clodronate liposomes后該如何操作?
A:收到氯磷酸脂質(zhì)體后,如果不能馬上使用,需要放置在4℃冰箱。禁止凍存!使用時(shí)作為原液使用,不能進(jìn)行稀釋。脂質(zhì)體很容易發(fā)生沉淀,建議使用之前輕輕混勻,另外4℃的氯磷酸脂質(zhì)體不能馬上使用,需要恢復(fù)到室溫才能進(jìn)行注射。
Q: Clodronate liposomes能否用于體外巨噬細(xì)胞清除?
A:產(chǎn)品可以用于體外巨噬細(xì)胞的清除,但是這種方法比較適合體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。主要是由于在體外培養(yǎng)過(guò)程中,從死亡細(xì)胞釋放的氯磷酸或者是從脂質(zhì)體中“滲漏”出來(lái)氯磷酸,會(huì)一直存在于培養(yǎng)基中,但是在體內(nèi),氯磷酸的半衰期很短,很快就會(huì)被腎臟清除。雖然游離的氯磷酸不會(huì)進(jìn)入細(xì)胞也不會(huì)進(jìn)入脂質(zhì)體,但是一旦他們?cè)谂囵B(yǎng)基中積累就會(huì)慢慢地進(jìn)入細(xì)胞中。
Q:在靜脈注射Clodronate liposomes后動(dòng)物很快就死亡了,是什么原因?
A:一方面有可能是動(dòng)物注射了不均一的脂質(zhì)體懸液。建議在使用之前輕輕搖晃混勻。脂質(zhì)體在體外一段時(shí)間后會(huì)發(fā)生沉降。如果在很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)需要一次注射多只動(dòng)物,那么脂質(zhì)體便會(huì)在注射器中發(fā)生沉淀,形成不均一懸液,這樣一來(lái),只注射的計(jì)量與后一只注射的計(jì)量就會(huì)發(fā)生明顯的變化。另外一方面有可能是脂質(zhì)體剛從冰箱取出后,沒(méi)有恢復(fù)到室溫。
Q:動(dòng)物在注射Clodronate liposomes后幾天就死亡了?
A:這個(gè)可能是受到細(xì)菌的污染,體內(nèi)清除巨噬細(xì)胞后會(huì)增加例如病毒粒子,細(xì)菌或者酵母感染的幾率。
Q:靜脈注射Clodronate liposomes后大鼠脾臟/肝臟中的ED1+細(xì)胞并沒(méi)有*消失?
A:大鼠中成熟的巨噬細(xì)胞呈現(xiàn)ED1和ED2雙陽(yáng)性,但是有一些沒(méi)有吞噬功能的或者吞噬作用小的前體細(xì)胞也是ED1+,但是呈現(xiàn)ED2-。因此,所有ED2+的細(xì)胞都可以被*清除,但是ED1+的細(xì)胞卻只能被部分清除,清除的比率取決于前體/成熟巨噬細(xì)胞的比例。
Q: Clodronate liposomes沒(méi)有達(dá)到期望的效果?
A:氯磷酸脂質(zhì)體都是大批量的生產(chǎn),每批次都會(huì)對(duì)氯磷酸的濃度以及一些可能的污染物進(jìn)行檢測(cè),確保無(wú)誤后才會(huì)銷(xiāo)售給客戶。另外,脂質(zhì)體容易收到溫度的影響。正確的運(yùn)輸和儲(chǔ)存方式是4~8℃,懸液既不能被凍存,也不能被加熱超過(guò)30℃。自收到貨物起,需要在3個(gè)月內(nèi)使用完,不然有可能會(huì)影響使用的效果。
Q:在靜脈注射時(shí),能不能增加注射的體積?
A:靜脈注射時(shí)需要依據(jù)動(dòng)物的體重,不能超過(guò)0.1ml/10mg,但是進(jìn)行腹腔注射可以適當(dāng)?shù)脑黾幼⑸涞捏w積。皮下注射需要根據(jù)注射位點(diǎn)的容量進(jìn)行決定。