QQ交談
您所在位置：請輸入產品關鍵字：
暫無信息 |
細胞大小測定及細胞計數注意事項
點擊次數：7583 發布時間：2021-2-23
一、細胞大小測定也稱顯微測微實驗， 主要是利用目鏡測微尺和鏡臺測微尺配合使用對細胞大小進行測定。
A:鏡臺測微尺:是一種特制的載玻片，*有一個全長1 mm 的刻度標尺，將1 mm 等分成100 個小格，每格長度為10 μm，用它來校正標定目鏡測微尺每小格的長度。
B:目鏡測微尺:是一塊可放在目鏡內的圓形薄片，*有刻度，并被分為50 小格，每小格的長度隨物鏡放大倍數的大小而變動。測量細胞大小之前，預先用鏡臺測微尺來標定某一物鏡放大倍數下目鏡測微尺每小格所代表的實際長度，再以它作為測量細胞的尺度。
二、細胞計數實驗利用血球計數板進行操作，其構造和計數原理是整個實驗的關鍵。
血球計數板:
由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成，玻片中有4 條下凹的槽，構成3 個平臺。中間的平臺較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面刻有一個方格網。方格網上刻有9 個大方格，其中只有中間的一個大方格為計數室，供計數用。這一大方格的長和寬各為1 mm，深度為0.1 mm，其體積為0.1 mm3。經過恰當稀釋的細胞懸液，加到血球計數板的計數室中，在顯微鏡下逐格計數，由于計數室的容積是固定的，故可將在顯微鏡下計得的菌體細胞數換算成單位體積的細胞數量， 經過此方法可測得樣品中細胞總和。
三、實驗注意事項：
1）利用小方格邊長50 μm 進行標定目鏡測微尺時，易產生2 種不同的結果。有些人目鏡測微尺兩端重疊時用的是靠近中方格的小方格，而計數室的特點就是中方格的邊緣線都為雙線， 靠近中方格的小方格的一邊也為雙線，導致結果不一致。所以要正確的利用單線小方格的邊長進行標定目鏡測微尺。
2）充分利用血球計數板， 不僅利用其小方格邊長的固定值，同時也利用其充當載玻片，在計數室內進行細胞計數，在計數室內外都可以進行細胞大小的測定。
3）細胞大小測定時，觀察酵母細胞應選擇代表性的細胞， 不要選擇剛剛出芽脫落下來的幼齡酵母，也不要選擇有明顯吸水膨脹的老齡酵母，觀察時一般選擇5~10 個典型酵母細胞求平均值。
4）細胞計數時應避免重復計數， 減少誤差， 嚴格按照“ 計左不計右，計上不計下" 的原則， 遇到有出芽的酵母， 只有當芽體與母細胞一樣大時計為2 個。