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電鏡銅網和支持膜問與答
點擊次數：1795 發布時間：2021-2-23
電鏡銅網和支持膜問與答 海德公司內部交流資料 在日常的技術支持工作中，經常碰到不同的客戶的同一個問題，回答的多了，就慢慢總結出來大多數實驗者急需知道的知識。這里列舉一二，供大家參考。 1.銅網、碳支持膜、微柵、超薄碳膜、多孔膜有什么區別？ 銅網：平常做透射電鏡所用的銅網，即為承載樣品的載網。載網若是銅材質，就稱銅網，如果是鎳、鉬、金、尼龍，就相應的稱鎳網、鉬網、金網、尼龍網。銅網也稱“裸網"。主要應用在生物制樣中，可配合切片機，在水槽中用“裸網"撈取樣品。再進行噴碳處理，然后進入電鏡觀察。 碳支持膜：大多數透射電鏡樣品在制樣時，為了確保樣品能搭載在“載網"上，會在“載網"上覆一層有機膜，稱為“支持膜"。這種具有支持膜的載網，稱為“載網支持膜"。當樣品接觸載網支持膜時，會很牢固的吸附在支持膜上，不至于從載網的孔洞處滑落。以便在電鏡下觀察。 當樣品放在電鏡中，“載網支持膜"會被電子束照射，有機支持膜上就會產生電荷積累，也會引起樣品放電，發生樣品飄逸、跳動、支持膜破裂等情況。所以，人們考慮在支持膜上噴碳，提高支持膜的導電性，達到良好的觀察效果。這種經過“噴碳的載網支持膜"，簡稱“碳支持膜"，一般膜厚度為10-20nm。 從制作成本和使用效果看，銅網實用，所以被普遍采用。因此，人們經常提到的“銅網支持膜"、“碳支持膜"、“碳膜"、“方華膜"等，甚至被誤稱的“銅網"，在我們的產品里面，就成為“碳支持膜"。注意，碳支持膜實際上是兩層膜，一層有機膜（方華膜），上層碳膜。 微柵支持膜 微柵是支持膜的一個品種，它是在制作支持膜時，特意在膜上制作了微孔，俗稱“微柵"，它主要是為了能夠使樣品搭載在支持膜微孔的邊緣，以便使樣品“無膜"觀察。無膜的目的主要是為了提高圖像襯度。 所以，觀察管狀、棒狀、納米團聚物等，常用“微柵"支持膜，效果很好。特別是觀察這些樣品的高分辨像時，更是的選擇。 一般直徑小于20nm的粉體才直接撈，顆粒再大則是包埋后離子減薄。撈樣品常用的有碳支持膜和小孔微柵，小孔微柵上其實也有一層超薄的碳膜。 超薄碳膜 也是支持膜的一種。它是在微柵的基礎上，疊加了一層很薄的碳膜，一般3-5nm。這層超薄碳膜的目的，是用薄碳膜把微孔擋住。既然微柵觀察效果，為什么還要把孔擋住呢？這主要是針對那些分散性很好的納米材料，如：10nm以下的樣品，分散性*的樣品。 多孔碳支持膜 據有普通碳支持膜和微柵支持膜共同特點的產品。普通碳支持膜以觀察形貌和考擦分散性為主，微柵支持膜以看高分辨為主。由于多孔膜有較大的支持膜面積，膜上又偶有微孔，這樣就可以兼得納米微粒的分散性考察和形貌像、高分辨像獲取。是一款很實用的支持膜產品。我公司代理的德國Quantifoil公司生產的Quantifoil多孔碳支持膜，與普通多孔碳膜相比，其固定的幾何外形便于在TEM上進行自動化操作。孔表面積大，可降低支持膜干擾造成的樣品失真。這在電子衍射，電子能量損失譜成像和暗場成像中非常重要。可用于支撐超薄碳膜或直接作為較大樣品的載體。此種膜還可應用于物質納米特征研究，如生物大分子復合體在載體自由懸層的研究。膜孔徑的定制范圍為1-7μm。膜厚度：18-20nm。 2.觀察長度不等的納米管的高分辨，選用哪種膜？ 看納米管一般有兩個目的，一是看長度，主要用低倍觀察；二是看管壁，主要是看高倍像。無論長度多少，只要看高倍像，特別是高分辨，用微柵膜或多孔膜。它既可以滿足低倍觀察長度，也可以滿足高分辨觀察的要求。但是你一定要選擇“高分辨透射電鏡"（HRTEM），否則，你的微柵膜就很難發揮作用。通常情況下，好的“碳支持膜"也能看到碳納米管壁的高分辨像，但它一定不會超過用“微柵膜"觀察的效果。理由是：微柵膜上有孔，管壁可以在微柵的孔洞處觀察，而碳支持膜沒有孔，膜層背底會影響高分辨的觀察。粉末樣品也是同樣的道理。 3.觀察納米材料和生物材料用什么銅網支持膜合適？ 次選購碳支持膜，往往不知道選用哪種目數的銅網支持膜合適。通常情況下，做納米材料，選用300目或200目銅網碳支持膜較適宜；做生物材料（切片樣品），選用200目或150目銅網碳支持膜較適宜。 如果做納米材料（50nm以下），而且要看高分辨像，選擇微柵；如果做納米材料（10nm以下），樣品分散性很好，選用超薄碳支持膜。但前提是要用高分辨電鏡（200kV以上）。如果使用的是100kV的電鏡，不必要選用微柵膜。 4.免疫電鏡實驗一般要選擇哪種網？ 免疫電鏡用載網要選用鎳網或金網，而不用銅網，因銅網會與某些化學物質產生反應而影響標記結果。